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ATCC細胞的培養與凍存及複蘇技巧

日期：2025-05-07 18:02

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摘要：

ATCC提供了多種類型的培養基，包括DMEM、RPMI-1640、F-10等。消費者在選擇培養基時，需要根據細胞株的特性進行選擇。例如，很多腫瘤細胞株通常在DMEM培養基中生長良好，而**細胞則更適合在RPMI-1640中培養。此外，培養基中的高濃度糖類和氨基酸是維持細胞生命的關鍵。

ATCC細胞一般在37°C、5% CO2的環境下進行培養。確保培養箱的溫度和CO2濃度穩定是至關重要的。過高或過低的溫度均會影響細胞的生長速度和形態，甚至導致細胞的死亡。此外，細胞在培養過程中需要適當的濕度，以防止培養基的蒸發帶來的濃度變化。

細胞凍存是細胞培養中的重要環節，通過低溫保存可以延長細胞的使用時間，從而便於後續實驗的開展。在細胞凍存和複蘇的過程中，掌握一些技巧是確保細胞成功存活的關鍵。

凍存前的準備

在對細胞進行凍存前，需要對細胞進行適當的處理。通常情況下，選擇對數生長期的細胞進行凍存效果最佳。此時，細胞增殖活躍，狀態良好，能夠提高凍存後的複蘇率。此外，使用適當的凍存液（例如含有10% DMSO和90%培養基的溶液）可以保護細胞在冷凍過程中的損傷。DMSO能夠有效降低細胞內的冰晶形成，減少細胞損傷。

凍存過程中的注意事項

在凍存過程中，溫度的下降速率非常重要。細胞應當在-80°C下進行初步冷凍，通常在4小時內降到-80°C，隨後轉移至液氮中保存。需要強調的是，避免細胞在冷凍過程中遭受大於-130°C的衝擊，以防止細胞過度**。

複蘇後的處理

複蘇細胞時，應從液氮中迅速取出細胞，立即置於37°C的水浴中解凍，時間控製在1-2分鍾內，之後迅速轉移至培養基中，以洗去凍存液。洗滌是為去除DMSO，以防止其對細胞活性的影響。複蘇後的細胞應當置於適宜的培養環境中，並盡量減少光照，以促進細胞恢複。

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